شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
مطالعه مقدماتی اکولوژیک مارمولک های شهرستان فردوس (استان خراسان جنوبی)
1
8
FA
حامد
استواری
دانشگاه آزاد اسلامی واحد فردوس, ایران
hamed_ostovari@yahoo.com
<strong> <span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_FormView1_Label3" dir="rtl">به منظور مطالعه مقدماتی فون مارمولک های شهرستان فردوس این تحقیق به مدت 7 ماه در استان خراسان جنوبی انجام شد. در مجموع، 72 نمونه از 11 ایستگاه از طریق پیادهروی و مشاهده مستقیم و با دست جمع آوری گردیدند. نمونه ها پس از جمعآوری، به آزمایشگاه منتقل شدند و با کمک کلید موجود در منابع، مورد شناسایی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که نمونه ها متعلق به 3 خانواده (Lacertidae, Agamidae, Gekkonidae)، 10 جنس و 17 گونه شامل: Teratoscincus scincus, T. bedriagai, Crossobamon eversmanni, Bunopus tuberculatus, Phrynocephalus scutellatus, Ph. mystaceus, Trapelus agilis, Eremias nigrocellata, E. fasciata, E. persica, Agamura persica, Mesalina watsonana, Cyrtopodion scabrum, C. caspium, C. longipes, Laudakia nupta, L. microlepis میباشند. در این تحقیق زیستگاه گونه های شناسایی شده نیز مورد مطالعه قرار گرفت.</span></strong><br /> <br /> <br /> <br />
مارمولک,فون,زیستگاه,شهرستان فردوس,استان خراسان جنوبی
http://www.aejournal.ir/article_102996.html
http://www.aejournal.ir/article_102996_bb8566108a708d56e90e203cd5db03bc.pdf
شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
هیستومورفومتری پوست ناحیه باله پشتی و ساقه دمی در ماهی شیربت (Barbus grypus)
9
16
FA
زهرا
بصیر
گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، صندوق پستی: 139
z.basir@scu.ac.ir
حسن
مروتی
دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران
hmorovvati@ut.ac.ir
محمود
خاکساری
گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز
mkhaksary@scu.ac.ir
مهرزاد
مصباح
گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز
mehrmesbah@yahoo.com
رحیم
عبدی
گروه زیست شناسی دریا، دانشکده علوم دریایی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر
abdir351@gmail.com
<strong>پوست به دلیل نقش محافظتی از اندام های داخلی بدن ماهی، حفظ تنظیم اسمزی و به عنوان شاخصی در تعیین سلامت ماهی می باشد. در مطالعات هیستومورفومتری به کمک میکروسکوپ نوری از پوست ناحیه باله پشتی قسمت بالایی، میانی و پایینی هم چنین ساقه دمی ۲۰ عدد ماهی شیربت نمونه هایی به ضخامت ۵ میلی متر تهیه و در محلول تثبیت کننده بوئن قرار داده شد و سپس به روش استاندارد بافت شناسی، برش هایی به ضخامت ۵ تا ۶ میکرومتر، تهیه و مورد رنگ آمیزی هماتوکسیلین- ائوزین (H&E) و اسید پریودیک شیف (PAS) قرار گرفتند. براساس نتایج هیستولوژی پوست این نواحی از دو طبقه شامل اپیدرم با سلول های متفاوت و درم که روی بافت همبند سست بنام هیپودرم قرار گرفته، تشکیل شده است. هم چنین براساس مطالعات هیستومتریک می توان پوست این نواحی را از لحاظ پراکنش سلول های مورد مطالعه به نواحی مختلف تقسیم بندی کرد. براساس مطالعه انجام شده بافت پوست در نقاط مورد مطالعه در ماهی شیربت از نظر ساختار میکروسکوپ نوری تفاوت هایی مانند عدم وجود جوانه های چشایی در ناحیه بالایی، میانی و ساقه دمی با بافت پوست در سایر گونه ها را دارد اما دارای شباهت هایی نیز می باشد که در این تحقیق به آن ها پرداخته شده است.</strong>
هیستومورفومتری,پوست,ماهی شیربت
http://www.aejournal.ir/article_102997.html
http://www.aejournal.ir/article_102997_ccd5b3a71bcaec9019cb5046b0e41ec4.pdf
شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
بررسی تراکم و الگوی پراکنش و پایداری خیار دریایی (Holothuria insignis: Holothuroidea) در نواحی بین جزر و مدی خلیج چابهار
17
24
FA
متین
خالقی
0000-0001-6419-7787
گروه زیست شناسی دریا، دانشکده علوم دریایی، دانشگاه دریانوردی و علوم دریایی چابهار
matinkhaleghi@yahoo.com
علیرضا
صفاهیه
گروه زیست شناسی دریا، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر
safahieh@hotmail.com
احمد
سواری
گروه زیست شناسی دریا، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر
a.savari@kmsu.ac.ir
بابک
دوست شناس
گروه زیست شناسی دریا، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر
babakduost@yahoo.com
فریدون
عوفی
موسسه تحقیقاتی علوم شیلاتی کشور
sillaginid@hotmail.com
<strong>این تحقیق با هدف شناسایی و بررسی تراکم و پراکنش خیار دریایی Holothuria insignis در نواحی بین جزر و مدی سواحل خلیج چابهار طی یک دوره زمانی از آبان ماه ۱۳۸۷ لغایت شهریورماه ۱۳۸۸ انجام گرفت. منطقه مورد مطالعه در منتهی الیه جنوب شرقی ایران و سواحل دریای عمان- استان سیستان و بلوچستان در محدوده جغرافیایی عرض شمالی «۴۷ ۲۲ °۲۵-»۶۱ ۱۶ °۲۵ و طول شرقی «۳۸ ۲۴ °۶۰-»۹۰ ۳۹ °۶۰ قرار دارد. نمونه برداری دو ماه یک بار به هنگام جزر کامل از ۵ ایستگاه انتخابی به صورت تصادفی و توسط پرتاب کوادرات ۱×۱ متر صورت گرفت. نمونه های جمع آوری شده، شمارش و شناسایی گردیدند و سپس تراکم و پراکنش و پایداری آن ها بررسی شد. نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که گونه H. insignis بیش ترین فراوانی را در دی ماه دارد. نتایج حاصل از شاخص پراکندگی و پایداری نشان داد که پراکنش گونه H. insignis در تمام ماه ها تصادفی می باشد و اکثرا گونه ای رایج به شمار می رود. در ایستگاه های ۲، ۳ و ۴ نمونه هایی از این گونه خیار دریایی مشاهده گردید.</strong>
Holothuria insignis,ناحیه بین جزر و مدی,تراکم,پراکنش,پایداری,خلیج چابهار
http://www.aejournal.ir/article_102998.html
http://www.aejournal.ir/article_102998_068fb7fcda525a35e8554277c6262038.pdf
شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
مقایسه غلظت ایزومرهای PCB در بافت پوست و عضله ماهیان کپور معمولی (Cyprinus carpio) و اردک ماهی (Esox lucius) با غلظت PCBs در آب، ذرات معلق در آب و رسوب تالاب انزلی (بخش آبکنار) در فصول پاییز و زمستان ۱۳۸۸
25
32
FA
باقر
تیموری
معاونت محیط زیست دریایی، سازمان حفاظت محیط زیست، تهران
teimouri47@yahoo.com
شیلا
صفاییان
گروه زیست شناسی دریا، دانشکده علوم و فنون دریایی، دانشگاه دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال
sh_safaeian@iau-tnb.ac.ir
سید محمد باقر
نبوی
گروه بیولوژی دریا، دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر
nabavishiba@yahoo.com
<strong>تحقیق حاضر به منظور تعیین سطوح PCBs (پلی کلرو بی فنیل ها) در بافت پوست و عضله اردک ماهی و ماهی کپور معمولی تالاب انزلی و مقاسیه آن ها با غلظت PCBs در آب، ذرات معلق در آب و رسوب تالاب انزلی (بخش غربی تالاب، آبکنار) در فصول پاییز و زمستان ۱۳۸۸ انجام شده است. ۴ ایستگاه برای دریافت نمونه آب، رسوب و ذرات معلق در آب و صید نمونه اردک ماهی و ماهی کپور در بخش آبکنار تالاب انزلی تعیین گردید. از هر گونه ماهی، ۹ عدد در هر فصل صید شد و این ماهیان مورد زیست سنجی (تعیین وزن، طول کل و استاندارد) قرار گرفتند و در شرایط استاندارد نمونه های دریافتی از آب، رسوب، ذرات معلق در آب و سپس ماهیان فوق الذکر به آزمایشگاه انتقال داده شدند و بافت پوست و عضله اردک ماهی و ماهی کپور را براساس استاندارد Moopam جدا نموده و پس از آماده سازی، استخراج و تمیزکردن آن ها، آنالیزPCBs با استفاده از دستگاه کروماتوگرافی گازی (GC - ECD) و دتکتور با اشعه یونیزان نیکل ۶۳ (Ni۶۳) انجام گردید. خطرناکترین ایزومرهای PCB (۲۸،۵۲،۱۰۱،۱۳۸،۱۵۳،۱۸۰) که به عنوان شاخص های PCB در آلودگی دریاها و بویژه مناطق ساحلی، مانند بنادر و خورها مورد مطالعه قرار می گیرند در بافت پوست و عضله ماهیان مورد بررسی وجود داشت. حداکثر غلظت ایزومرهای خطرناک ذکر شده در فصل پاییز در پوست و عضله اردک ماهی و ماهی کپور در ایزومرهای با کلر بیش تر بود (PCB ۱۵۳ &۱۳۸) ولی در محیط های اندازه گیری شده آب، ذرات معلق در آب و رسوب در ایزومرهای با کلر کم تر (PCB ۵۲) بیش ترین غلظت را داشتند.</strong>
پلی کلرو بی فنیل ها,اردک ماهی,ماهی کپور,تالاب انزلی
http://www.aejournal.ir/article_102999.html
http://www.aejournal.ir/article_102999_5aa86f05fec4ab1b79c563c8ccc2d64a.pdf
شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
کلون سازی مولکولی ژن های luxA وluxB باکتری Vibrio fischeri
33
40
FA
گلناز
اسعدی تهرانی
گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه و پزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد زنجان
golnaz_asaadi@yahoo.com
سینا
میرزا احمدی
گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه و پزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد زنجان
sinacanmir@yahoo.com
مژگان
بنده پور
مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی ، دانشکده پزشکی ، شهید بهشتی
دانشگاه علوم پزشکی ، تهران، ایران
bandehpour@gmail.com
فرامرز
لالویی
پژوهشکده اکولوژی دریای خزر، ساری، ایران
بهرام
کاظمی
گروه بیوتکنولوژی، دانشکده فناوریهای نوین پزشکی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران
bahram_14@yahoo.com
اکرم
عیدی
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران
eidi@srbiau.ac.ir
تورج
ولی نسب
0000-0002-4825-5024
موسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، تهران، صندوق پستی: 6116- 14155
t_valinassab@yahoo.com
<strong>پرتوافکنی زیستی در باکتری ها پدیده ای است که توسط آنزیم های لوسی فراز سازماندهی می گردد. این آنزیم ها به صورت هترودایمری متشکل از زیر واحدهای α و β هستند که توسط ژن های luxA و luxB رمز شده و همراه با ژن های luxCDE رمز کننده پروتئین های مورد نیاز جهت سنتز سوبسترای آلدئیدی، اپران lux باکتریVibrio fischeri را تشکیل می دهند. در تحقیق حاضر ناحیه کروموزومی واجد ژن های luxA و luxB باکتری Vibrio fischeri تکثیر شده و متعاقبا قطعات تزاید یافته در وکتور pTZ۵۷R کلون گردیدند. تائید کلونینگ ژن های luxA و luxB به واسطه روش های PCR و هضم آنزیمی صورت پذیرفت. سرانجام تائید نهایی ژن های کلون شده luxA و luxB توسط روش تعیین توالی انجام گرفت که به ترتیب به میزان ۹۵ و ۸۹ درصد هم سانی با توالی های مرتبط در بانک ژنی را نشان دادند.</strong>
پرتوافکنی زیستی,لوسی فراز,اپران lux,Vibrio fischeri
http://www.aejournal.ir/article_103000.html
http://www.aejournal.ir/article_103000_9a077a6f6d30de1907ef9fc724fd2319.pdf
شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
بررسی برخی خصوصیات زیستی و شاخص های هم آوری سیاه ماهی ماده (Capoeta capoeta gracilis eyserling ۱۸۶۱) در رودخانه سفیدرود
41
48
FA
مجید
راستا
باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، واحد لاهیجان، دانشگاه آزاد اسلامی، لاهیجان، ایران، صندوق پستی: 1616
rasta_majid@yahoo.com
علی
خدادوست
باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، واحد لاهیجان، دانشگاه آزاد اسلامی، لاهیجان، ایران، صندوق پستی: 1616
حسین
خارا
0000-0002-4010-9428
گروه شیلات، واحد لاهیجان، دانشگاه آزاد اسلامی
h.khara1974@yahoo.com
مینا
رهبر
باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، واحد لاهیجان، دانشگاه آزاد اسلامی، لاهیجان، ایران، صندوق پستی: 1616
m.rahbar27@gmail.com
<strong><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_FormView1_Label3" dir="rtl">سیاه ماهی (Capoeta capoeta gracilis) یکی از ماهیان نیمه اقتصادی حوضه آبریز دریای خزر است. این ماهی رودزی بوده و در رودخانهها تخم ریزی مینماید. مطالعه وضعیت هماوری و زیستسنجی یکی از شاخص های مهم بیولوژی تولید مثل ماهیان میباشد. به همین دلیل در بهار 1389 هماوری و زیستسنجی سیاه ماهی رودخانه سفیدرود مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور از منطقه مورد نظر 36 عدد سیاه ماهی ماده در گروه سنی 2، 3 و 4 ساله، صید شدند. طبق نتایج به دست آمده در بین ماهیان میانگین طول کل برابر با 22/13±195/5 میلی متر (256-152 میلی متر)، میانگین طول چنگالی برابر با 20/98±182/19 میلی متر (238- 144 میلی متر)، میانگین طول استاندارد برابر با 19/62±168/38 میلی متر (220-130 میلی متر)، میانگین وزن بدن برابر با 30/75±85/11 گرم (165/30-40/10 گرم)، وزن گناد 0/98±2/23 گرم (4/60-0/52 گرم)، میانگین هماوری مطلق برابر با 759/38±1572/60 عدد تخمک (3901/28-605/55 عدد تخمک)، میانگین هماوری نسبی برابر با 9/68±19/51 (57/27-8/77)، میانگین تعداد تخمک در هر گرم از وزن بدن برابر با 38/82±76/74 گرم (263/70-22/60 گرم)، قطر تخمک 0/21±1/16 میلی متر (2/23-0/98 میلی متر) و میانگین شاخص گنادوسوماتیک برابر با 2/63 درصد (4/9-0/9 درصد) بود. بیش ترین میانگین هماوری مطلق (699/64±2355/27 عدد تخمک) مربوط به مولدین 4 ساله و بیش ترین میانگین هماوری نسبی (12/90±22/50) مربوط به مولدین 2 ساله بود. در بین گروه های مختلف سنی ماهیان از نظر طول کل، طول چنگالی، طول استاندارد، وزن بدن، وزن گناد، تعداد تخمک در هر گرم از وزن بدن ، هماوری مطلق و هماوری نسبی تفاوت ها معنیدار بودند (0/05 ></span></strong><strong><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_FormView1_Label3" dir="rtl">P</span></strong><strong><span dir="rtl"> ) ولی از نظر قطر تخمک و شاخص گنادوسوماتیک تفاوتها معنیدار نبود (0/05 <</span></strong><strong><span dir="rtl">P)</span></strong><br /> <br /> <br /> <br /> <strong> </strong>
سیاه ماهی,مولدین ماده,زیست سنجی,هماوری,رودخانه سفیدرود
http://www.aejournal.ir/article_103001.html
http://www.aejournal.ir/article_103001_f285440cfc9f686d03647879049a9d92.pdf
شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
اثرات تغذیه درون تخم مرغ گلوتامین بر عملکرد، ریخت شناسی روده کوچک و پاسخ ایمنی جوجه های گوشتی
49
58
FA
محسن
توسلی
گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ورامین- پیشوا
mohsen_ta4752@yahoo.com
سید ناصر
موسوی
گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ورامین- پیشوا
snmousavi@hotmail.com
محمدرضا
عابدینی
گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ورامین- پیشوا
drabedini@gmail.com
<strong> <span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_FormView1_Label3" dir="rtl">در روز شانزدهم جوجه کشی، 600 عدد تخم مرغ بارور مرغ مادر گوشتی راس 308 انتخاب و پس از توزین، در قالب یک طرح بلوک کاملا تصادفی به 5 گروه آزمایشی با 4 تکرار و هر تکرار شامل 30 عدد تخم مرغ اختصاص داده شدند. گروه های آزمایشی شامل 1) بدون تزریق (شاهد)، 2) تزریق محلول کلرید سدیم 0/9 درصد، 3) تزریق محلول 0/5 درصد گلوتامین، 4) تزریق محلول یک درصد گلوتامین در محلول 0/9 درصد کلرید سدیم و 5) گروه تغذیه شده با یک درصد مکمل جیره ای گلوتامین در دوره پرورش بودند. در روز هجدهم جوجه کشی، یک میلیلیتر از محلول های مورد آزمایش به مایع آمنیوتیک هر یک از تخم مرغ ها تزریق شد و با گروه شاهد و گروه دریافت کننده یک درصد گلوتامین جیره ای، مشابه گروه های دیگر عمل شد. پس از تفریخ، جوجه ها توزین شده و به سالن آزمایش منتقل شدند و تا 42 روزگی پرورش داده شدند. در روز سوم پرورش، به منظور بررسی ویژگی های ریختشناسی روده کوچک، از ژژنوم جوجه های گوشتی نمونهبرداری انجام شد. در روز 21 و 28 پرورش، جهت تعیین تیتر آنتی بادی ضد (SRBC (Sheep Red Blood Cells خونگیری به عمل آمد. تزریق محلول 0/5 درصد گلوتامین در مقایسه با گروه شاهد بدون تزریق، باعث بهبود افزایش وزن بدن جوجه ها هنگام تفریخ گردید (0/05></span></strong><strong><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_FormView1_Label3" dir="rtl">P</span></strong><strong><span dir="rtl">)، تزریق هر یک از محلولها تاثیر معنیداری بر درصد جوجه در آوری نداشت. تزریق گلوتامین در تخممرغ های مادر گوشتی مانند افزودن گلوتامین به جیره، بر صفات عملکردی دوره پرورش، ویژگی های ریختشناسی روده کوچک و پاسخ ایمنی ضد SRBC تاثیر معنی داری نداشت.</span></strong><br /> <br /> <br /> <br />
تزریق درون تخم مرغ,گلوتامین,جوجه های گوشتی,ریختشناسی روده,ایمنی
http://www.aejournal.ir/article_103002.html
http://www.aejournal.ir/article_103002_ef9c7755c428af5ba9f4b409ffacb99d.pdf
شرکت مهندسین مشاور شیل آمایش
فصلنامه محیط زیست جانوری
2717-1388
2717-1396
3
2
2011
07
23
تاثیر سن مولدین نر بر کارایی تکثیر مصنوعی در ماهی کپور سرگنده (Aristichthys nobilis)
59
66
FA
حدیثه
دادرس
باشگاه پژوهشگران جوان دانشگاه آزاد اسلامی، واحد لاهیجان
h.dadrass@yahoo.com
مهری
زحمتکش
باشگاه پژوهشگران جوان دانشگاه آزاد اسلامی، واحد لاهیجان
حسین
خارا
0000-0002-4010-9428
گروه شیلات، واحد لاهیجان، دانشگاه آزاد اسلامی
h.khara1974@yahoo.com
شهروز
برادران نویری
بخش ژنتیک و بیوتکنولوژی، موسسه تحقیقات بین المللی تاسماهیان دریای خزر، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی،
رشت، ایران، صندوق پستی: 9343-37491
shahrouzbn170@gmail.com
شعبانعلی
نظامی بلوچی
مؤسسه تحقیقات شیلات ایران، تهران
sha_nezami2004@yahoo.com
<strong><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_FormView1_Label3" dir="rtl">ماهی کپور سرگنده (Aristichthys nobilis) از نظر اقتصادی یکی از ماهیان با ارزش در سیستم پرورش چند گونهای میباشد. فرایند تکثیر مصنوعی و تولید لارو یکی از مسایل مهم در پرورش این گونه محسوب میگردد، که در این بین مولدین نر نقش برجستهای را ایفا میکنند. در این راستا تاثیر سن مولدین نر بر کارایی تکثیر مصنوعی ماهی کپور سرگنده در فصل تکثیر (اواخر بهار) 1389 بررسی گردید. در این تحقیق تخمک های 3 مولد ماده 4 ساله با اسپرم مولدین نر 3 ساله (تیمار 1)، 2 ساله (تیمار 2) و ترکیب 3 و 4 ساله (تیمار 3) به طور جداگانه لقاح داده شد. میزان طول دوره تحرک اسپرم، درصد تحرک اسپرم، pH و تراکم اسپرم و نرخ تفریخ فاقد تفاوت معنیدار بود (0/05<P)، اما میزان اسپرماتوکریت در نرهای 4 ساله به طور چشمگیری بیش تر بود (0/05 <P). بیش ترین میزان درصد لقاح و بازماندگی لارو متعلق به تیمار 3 بود (0/05>P). براساس این تحقیق، ترکیب اسپرم های استحصالی از مولدین 3 و 4 ساله اثر مثبتی بر کارایی لقاح دارد.</span></strong><br /> <br /> <br /> <br />
تکثیر مصنوعی,سن,مولدین نر,کپور سرگنده
http://www.aejournal.ir/article_103003.html
http://www.aejournal.ir/article_103003_b82d45c51d6bc69f0c5e264d301da9e6.pdf