اثرات غلظت های تحت کشنده سولفات مس بر بیان ژن ویتلوژنین در جنس ماده ماهی گورخری (Danio rerio)

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

گروه شیلات، دانشکده شیلات و محیط زیست، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، گرگان، ایران

چکیده

در این تحقیق تأثیرغلظت­ های تحت­ کشنده سولفات مس بر بیان ژن ویتلوژنین (Vtg) در جنس ماده ماهی گورخری (Danio rerio) بررسی شد. تعداد 180 قطعه بچه ­ماهی‌ گورخری ماده با میانگین وزنی وزنی 0/05±0/3 ‌گرم در 3 تیمار و 3 تکرار به ­مدت یک­ ماه تحت تأثیر دو غلظت تحت­ کشنده سولفات مس 0/02 و 0/04 میلی‌ گرم بر لیتر و تیمار شاهد قرار گرفتند. در انتهای دوره جهت مطالعات ژنتیکی از کبد نمونه‌ برداری و استخراج RNA انجام شد. برای سنتز cDNA از کیت Superscript RTase استفاده ‌شد و cDNA حاصله با استفاده از پرایمر ژن مذکور و ژن بتا اکتین به‌ عنوان ژن رفرنس در Real Time PCR استفاده شد. ارزیابی بیان ژن (Vtg) کاهش بیان این ژن را در گروه ­های تیمار شده با سولفات مس نسبت به گروه شاهد نشان داد. هم چنین در گروه ­های تیمار شده با سولفات مس 0/02 و  0/04 میلی­ گرم بر لیتر میزان بیان ژن به ­ترتیب 0/66 و 0/59 برابر گروه شاهد بود که الگوی کاهشی وابسته به غلظت را نشان می ­دهد. نتایج مطالعه حاضرنشان می  ­دهد که سولفات مس می ­تواند اثر منفی بر رشد و تکامل سلول ­های جنسی در جنس ماده ماهی زبرا داشته باشد.  

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Effects of different doses of CuSo4 on the expression of vitellogenin in females Zebrafish (Danio rerio)

نویسندگان [English]

  • Bahareh Shokouhian Ghahfarokhi
  • Roghieh Safari
  • Mohamad Reza Imanpoor
  • Ali jafar Nodeh
Department of Fisheries, Faculty of Fisheries and Environment, Gorgan University of Agricultural Sciences and Natural Resources, Gorgan, Iran
چکیده [English]

 The present study investigates, the effects of sub lethal doses of CuSo4 on the expression of vitellogenin (Vtg) in females Zebrafish (Danio rerio). For this purpose, 180 Zebrafish with an average weight of 0.3±0.05 gr were exposed to two doses of 0.02 and 0.046 mg /l of CuSo4, and a control group for 30 days. At the end of experiment RNA extracted from liver, cDNA synthesized with Superscript RTase kit and PCR was done using primers relate to Vtg and Beta-actin as housekeeping genes. The evaluation of Vtg expression genes showed reduction in CuSo4-treated groups compared to the control. In the CuSo4-treated groups (0.02 and 0.04 mg /l), Vtg gene expression was 0.66 and 0.59 fold of control which showed dose-dependent reduction pattern. Results indicated that CuSo4 can have a negative effect on the growth and development of sexual cells in zebra fish.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Copper sulfate
  • Gene expression
  • Vitologenin
  • Zebra fish
  1. بنایی،  م.؛ میرواقفی، ع.ر.؛ احمدی، ک. و عاشوری،  ر.،  ۱388. تاثیر غلظت تحت­ کشنده دیازینون بر تغییرات هیستوپاتولوژیک بیضه و تخمدان کپورمعمولی. مجله بیولوژی دریا. دوره 1، شماره 2، صفحات 14 تا 26.
  2. درویشی، م.؛ صفری، ر.؛ شعبانی، ع.؛ حسینی ­فر، س.ح.، 1397. تاثیر غلظت­ های تحت کشنده دیازینون بر بافت تخمدان در ماهی گورخری. فصلنامه محیط ­زیست جانوری. سال 10، شماره 1، صفحات 257 تا 262.
  3. شاپوری،  م.؛  عریان،  ش،؛  اسماعیلی ­ساری،  ع.،  1388. ﺑﺮرﺳﻲ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﻓﻠﺰ ﻣﺲ ﺑﺮ ﺗﻐﻴﻴﺮات ﻫﻴﺴﺘﻮﭘﺎﺗﻮﻟﻮژﻳﻚ ﺑﺎفت­ های ﻋﻀﻠﻪ، ﻛﺒﺪ و ﮔﻨﺎد ﻛﭙﻮر ﻣﻌﻤﻮﻟﻲ. مجله دامپزشکی دانشگاه آزاد. سال 3، شماره 6، صفحات 24 تا 29.
  4. محمدنژادشموشکی، م،؛ سلطانی، م،؛ شریف ­پور، ع،؛  ایمانپور، م.ر،؛  بهارلویی، ا،؛  نعیمی، م. ا.، ۱۳۹۰. بررسی اثر غلظت‌های تحت کشنده سم دیازینون بر بافت‌ های گناد، مغز و قلب مولدین نر ماهی سفید. مجله دامپزشکی دانشگاه آزاد تبریز. دوره 5، شماره 3، صفحات 1 تا 15.
  5. Boyd, CE., 1990.  Water quality in ponds for aquaculture. Alabama Agricultura. Experiment Station, Auburn University, USA.
  6. De Boeck, G.; aeminck, A. and Blust, R., 1997. Effects of sublethal Cu exposure on Cu accumulation, food consumption, growth, energy stores, and nucleic acid content in common carp. Arch. Environ. Contam. Toxicol. Vol. 33, pp: 415-422.
  7. Fanta, E.; Rios, F.S.; Romao, S.; Vianna, A. and Freiberger, S., 2003. Histopathology of the fish Corydoras paleatus contaminated with sublethal levels of organophosphorus in water and food. Ecotoxicology and Environmental Safety. Vol. 54, pp: 119-130.
  8. Fernandes, A.; Ferreira-Cadoso, J.V.; Garcia-Santos, S.; Monteiro, S.M.; Carrola, J.; Matos, P. and Fontainhas Fernandes, A., 2007. Histopathological changes in liver and gill epithelium of Nile tilapia (Oreochromis niloticus), exposed to waterborne copper. Pesquisa Veterinaria Brasileria. Vol. 27, No. 3, pp: 103-109.
  9. Finpederson, R., 1994. Ecotoxicological Evaluation of indutrial wast water, Ministry of the Envoronment, Denmark. pp: 360-380.
  10. Jinling, C.; Guodong, W.; Tianyu, W.; Jianjie, Ch.; Guo Wenjinga, P.; Wua, X.H. and Lingtian, X., 2019. Copper caused reproductive endocrine disruption in zebrafish (Danio rerio). Aquatic Toxicology. Vol. 211, pp: 124-136.
  11. Kwon, B.; Shin, H.; Moon, H.B.; Ji, K. and Kim, K.T., 2016. Effects of tris (2-butoxyethyl) phosphate exposure on endocrine systems and reproduction of zebrafish (Danio rerio). Environmental Pollution. Vol. 214, pp: 568-574.
  12. Krishnani, K.K.; Azad I.S.K.; Thirunavukkarasu, A.R.; Gupta, B.P., 2003. Acute toxicity of some heavy metals to Lates calcarifer fry with a note on its histopathological manifestations. J Environ Sci Health A.Vol. 38, pp: 645-655.
  13. Ling, X.P.; Zhu, J.Y.; Haung, L. and Huang, H.Q., 2009. Proteomic changes in response to acute cadmium toxicity in gill tissue of Paralichthys olivaceus. Environmental Toxicology and Pharmacology. Vol. 27, pp: 211-218. 
  14. Liu, C.; Deng, J.;Yu,L.;Ramesh,M.andZhou,B.,2010a. Endocrine disruption and reproductive impairment in zebrafish by exposure to 8:2 fluorotelomer alcohol. Aquat. Toxicol. Vol. 96, pp: 70-76.
  15. Mcgeer, J.C.; Szebedinszky, C.; Mcdonald, D.G. and Wood, C.M., 2015. Effects of chronic sublethal exposure to waterborne cu, cd or zn in rainbow trout. 1: iono-regulatory disturbance and metabolic costs. Aquat. Toxicol. Vol. 50, No. 3, pp: 231-243.
  16. Santos, H.B.; Sato, Y.; Moro, L.; Bazzoli, N. and Rizzo, E., 2008. Relationship among follicular apoptosis, integrin β1 and collagen type IV during early ovarian regression in the teleost Prochilodus argenteus after induced spawning. Cell and tissue research. Vol. 332, pp: 159-170.
  17. Sassi, A.;  Darias, M.J.; Said, K.; Messaoudi, I. and Gisbert, E., 2013. Cadmium exposure affects the expression of genes involved in skeletogenesis and stress response in gilthead sea bream larvae. Fish Physiology and Biochemistry. Vol. 39, No. 3, pp: 649-659.
  18. Shobikhuliatul, J.J.; Andayani, S.; Couteau, J.; Risjani, Y. and Minier, C., 2013. Some aspect of reproductive biology on the effect of pollution on the histopathology of gonads in Puntius javanicus from Mas river, surabaya, indonesia. J. Biol. Life Sci. Vol. 4, pp: 191-205.
  19. Sobha, K.; Poornima, A.; Harini, P. and Veeraiah, K., 2007. A study on biochemical changes in the fresh water fish. (Catla catla) exposed to the heavy metal toxicant cadmium chloride. Journal of Science Engineering and Technology. Vol. 1, No. 5. pp: 1-11.
  20. Yacoub, A.M. and Gad, N.S., 2012.  Accumulation of some heavy metals and biochemical alterations in muscles of Oreochromis niloticus from the River Nile in Upper Egypt. Int. J. Environ. Sci. Eng. Vol. 3, pp: 1-10.
  21. Zhang, Q.F.; Li, Y.W.; Liu, Z.H. and Chen, Q.L., 2016. Reproductive toxicity of inorganic mercury exposure in adult zebrafish: histological damage, oxidative stress, and alterations of sex hormone and gene expression in the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. Aquatic Toxicology. Vol. 177, pp: 1-10.