تاثیر پپتیدهای ضدرگ‌زایی بربیان ژن های Caspase-3 و Caspase-9 در مدل موش Balb/c دارای سرطان پستان القا شده با رده سلولی 4T1

نوع مقاله: ژنتیک

نویسندگان

1 گروه زیست شناسی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران

2 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران

3 گروه بیوشیمی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران

چکیده

سرطان پستان شایع‌ ترین نوع سرطان در زنان است و ۲۵درصد تمام موارد سرطان را به ­خود اختصاص می‌دهد. در همه سرطان‌ها از جمله سرطان پستان مراحل رشد، تهاجم و متاستاز وابسته به عوامل درون سلولی متعددی است که یکی از آن­ها فرایند رگ‌ ­زایی (آنژیوژنز) می‌ باشد. هدف از این مطالعه بررسی اثر پپتید‌های ضد رگ ­زایی طراحی شده بر بیان ژن کاسپاز-3 و کاسپاز-9 در موش‌های Balb/c بوده است. در این تحقیق از نمونه بافت آماده موش ­های Balb/c ماده استفاده گردید که قبلاً به تومور پستان موشی مشتق از رده سلولی 4T1 مبتلا شده بودند(پس از بی­ هوشی با تزریق درون صفاقی (IP) به­ مدت 3 تا 5 هفته به پهلوی چپ آن‌ها پیوند زده شده بود). سپس استخراج TOTAL RNA از نمونه‌ های توموری تحت تیمار با پپتیدهای ضد رگ ­‌زایی در غلظت‌های1 و 10 میکروگرم بر کیلوگرم انجام گردید. سنتز cDNA جهت پایدار کردن مولکول RNA انجام شد. پرایمرها جهت انجام Real time PCR برای هر دو ژن کاسپاز-3 و 9 طراحی و سنتز شد. اختصاصیت اتصال پرایمرها به رشته الگو تایید گردید. سپس تجزیه و تحلیل آماری با نرم‌ افزار SPSS انجام گردید. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که اختلاف معنی‌ داری بین تیمارهای هر گروه از پپتید‌های ضد رگ ­‌زایی (VEGB1,VEGB2,VEGB3) در غلظت‌های 1 و 10 میکروگرم بر کیلوگرم و میزان بیان ژن کاسپاز-3و9 وجود دارد (0/05>p). در واقع هر سه پپتید ضد آنژیوژنز می‌ تواند مسیر سیگنالینگ VEGFR را از طریق تنظیم مقادیر کاسپاز-3 و کاسپاز-9 مهار کند و منجر به افزایش آپوپتوز در تومور گردد.

کلیدواژه‌ها


  1. Bhutia, S.K. and Maiti, T.K., 2008. Targeting tumors with peptides from natural sources Trends 9, caspase-3 and caspase-7 have distinct roles during intrinsic apoptosis in biotechnology. Vol. 26, No. 4, pp: 210-217.
  2. Budihardjo, I.; Oliver, H.; Lutter, M.; Luo, X. and Wang, X., 1999. Biochemical pathways of caspase activation during apoptosis. Annu Rev Cell Dev Biol. No. 15 pp: 269-90.
  3. Calle, E.E.; Feigelson, H.S.Hildebrand, J.S.Teras, L.R.; Thun, M.J. and Rodriguez, C., 2009. Postmenopausal hormone uses and breast cancer associations differ by hormone. Cancer. Vol. 115, No. 7, pp: 15-87.
  4. Crawford, Y. and Ferrara, N., 2009. VEGF inhibition: insights from preclinical and clinical studies. Cell and Tissue Research. Vol. 335, No.1, pp: 261-269.
  5. Ebos, J.; Lee, C.; Cruz-Munoz, W. and Bjarnason, G., 2009. Accelerated Metastasis after Short-Term Treatment with a Potent Inhibitor of Tumor Angiogenesis. cancer cell. Vol. 15, No. 3, pp: 232-239.
  6. Entezarmahdi, R., 2012. Overview of the National Cancer Control Program Breast of the Islamic Republic of Iran (First and second levels prevention). Arvige Publishing Company pp: 46-70.
  7. Ferrara, N., 2002. VEGF and the quest for tumor angiogenesis factors. Nature Reviews Cancer. 795 p.
  8. Folkman, J., 2010. Angiogenesis an integrative approach from science to medicine. Springer; New York. 601 p.
  9. Hanahan, D. and Folkman, J., 1996. Patterns and emerging mechanisms of the angiogenic switch during tumorigenesis. cell. Vol. 86, No. 3, pp: 353-364.
  10. Hardwick, J.M. and Soane, L., 2013. Multiple functions of BCL-2 family proteins. Cold Spring Harb Perspect Bio. Vol. 1, No. 2, pp: 5.
  11. Harris, H.R.; Tamimi, R.M.Willett, WC.Hankinson, S.E. and Michels, K.B., 2011. Body size across the life course, mammographic density, and risk of breast cancer. American j of epidemiology. Vol. 174, No. 8, pp: 909-918.
  12. Kilbride, S.M. and Prehn, J.H., 2013. Central roles of apoptotic proteins in mitochondrial function. Oncogene. No. 32, pp: 2703-2711.
  13. Kohler,T.;Schill,C.; Deininger,M.W.; Krahl,R.; Borchert,S.; Hasenclever, D.; Leiblein, S.; Wagner, O. and Niederwieser, D., 2002. High Bad and Bax mRNA expression correlate with negative outcome in acute myeloid leukemia (AML). Leukemia. No. 16, pp: 22-29.
  14. Linderholm, B.K.; Lindahl, T.Holmberg, L.Klaar, S.; Lennerstrand, J.; Henriksson, R. and Bergh, J., 2001. The expression of vascular endothelial growth factor correlates with mutant p53 and poor prognosis in human breast cancer. Cancer Research. Vol. 61, No. 5, pp: 2256-2260.
  15. Liu, Y.; Cox, S.R.Morita, T. and Kourembanas, S., 1995. Hypoxia regulates vascular endothelial growth factor gene expression in endothelial cells. Identification of a 5’enhancer. Circulation research. Vol. 77, No. 3, PP: 638-643.
  16. Mylona,E.P.;AlexandrouA.;MpakaliI.;Giannopoulou, G.; LiapisS.; MarkakiA.; Keramopoulos, L. andNakopoulou, D., 2007. Clinicopathological and prognostic significance of vascular endothelial growth factors (VEGF)-C and-D and VEGF receptor 3 in invasive breast carcinoma. European Journal of Surgical Oncology (EJSO). Vol. 33, No.3, pp: 294-300.
  17. Oberst, A.; Dillon, C.P.; Weinlich, R.; McCormick, L.L.; Fitzgerald, P.; Pop, C.; Hakem, R.; Salvesen, G.S. and Green, D.R., 2011. Catalytic activity of the caspase-8- FLIP (L) complex inhibits RIPK3-dependent necrosis. Nature. No. 471, pp: 363-367.
  18. Okarvi, S.M., 2008. Peptide-based radiopharmaceuticals and cytotoxic conjugates: potential tools against cancer. Cancer Treat. No. 34, pp: 13-26.
  19. Osaki, M.; Oshimura, M. and Ito. H., 2004. PI3K-Akt pathway: its functions and alterations in human cancer. Apoptosis. Vol. 9, No. 6, pp: 667-676.
  20. Park, H.; Ju, E.; Jo, S.; Jung, U.; Kim, S. and Yee, S., 2009. Enhanced antitumor efficacy of cisplatin in combination with HemoHIM in tumor-bearing mice. BMC Cancer. pp: 9-85.
  21. Potente, M.; Gerhardt, H. and Carmeliet, P., 2011. Basic and therapeutic aspects of angiogenesis. Cell. No. 146, pp: 873-887.
  22. Sah, N.K.; Khan, Z.; Nelly, M.F.;Pablo, D.M.;Rodriguez, S.S.and Ronell, B.M., 2006.  Structural, functional and therapeutic biology of survivin. Cancer letters. Vol. 244, No. 2, pp: 164-171.
  23. Saladin, P.M.; Zhang, B.D. and Reichert, J.M., 2009. Current trends in the clinical development of peptide therapeutics. IDrugs. Vol. 12, No. 12, pp:779-784.
  24. Salem, L.; ElKholy, S.M. and Al-Atrash, A., 2016. spleen and cancer cells in an experimental mouse model of Ehrlich ascite carcinoma. J of Solid Tumors. Vol. 6, No. 1, pp: 78.
  25. Senger, D.; Brown, L.F.Claffey, K.P. and Dvorak, H.F., 1994. Vascular permeability factor, tumor angiogenesis and stroma generation. Invasion & metastasis.Vol. 14, No .6, pp: 385-394.
  26. Shing, Y.; Folkman, J.Sullivan, R.Butterfield, C.Murray, J. and Klagsbrun, M., 1984. Heparin affinity: purification of a tumor-derived capillary endothelial cell growth factor. Science. Vol. 223, No. 4642, pp: 1296-1299.
  27. Vecchia, L.C.; Giordano, S.H.;Hortobagyi, G.N. and Chabner, B., 2011. Overweight, obesity, diabetes, and risk of breast cancer: interlocking pieces of the puzzle. The oncologist. Vol. 16, No. 6, pp: 726-729.
  28. Vlieghe, P.; Lisowski, V.; Martinez, J. and Khrestchatisky, M., 2010. Synthetic therapeutic peptides.: science and market. Drug discovery today. Vol. 15, No. 2, pp: 40-56.